生物標(biāo)本常用反應(yīng)劑的配制

1、檢查葡萄糖試劑 配方一 本尼迪克(Benedict)溶液 (1) 在400毫升蒸餾水中溶解85克檸檬酸鈉和50克無(wú)水碳酸鈉。 (2) 在50毫升加熱的蒸餾水中溶解8.5克硫酸銅。 把硫酸銅溶液緩緩倒入檸檬酸鈉-碳酸鈉溶液中,邊加邊攪拌,

   1、檢查葡萄糖試劑

配方一    本尼迪克(Benedict)溶液

(1) 在400毫升蒸餾水中溶解85克檸檬酸鈉和50克無(wú)水碳酸鈉。

(2) 在50毫升加熱的蒸餾水中溶解8.5克硫酸銅。

把硫酸銅溶液緩緩倒入檸檬酸鈉-碳酸鈉溶液中,邊加邊攪拌,如果產(chǎn)生沉淀,要過(guò)濾。本尼迪克溶液配制后能長(zhǎng)期使用(存放時(shí)間較久而產(chǎn)生沉淀是,取上層清液使用,不必重新配制)。

本尼迪克溶液用來(lái)測(cè)試食物、血液和尿中的葡萄糖,可測(cè)出0.15 ~0.20%的葡萄糖。這種溶液跟未知物同加熱時(shí),如果未知物中有葡萄糖,會(huì)形成紅色的氧化亞銅沉淀物。

配方二  裴林(Fehling)溶液

(1)把34.5克硫酸銅溶于500毫升蒸餾水中。

(2)把125克氫氧化鉀(鈉)和173克酒石酸鉀鈉溶解在500毫升蒸餾水中。

上述兩種溶液應(yīng)分別保存。在檢測(cè)葡萄糖時(shí),使他們等量的混合,加入待測(cè)物的試管內(nèi),加熱到沸騰。如果有葡萄糖,會(huì)形成紅色的氧化亞銅沉淀物。

2、檢查淀粉的試劑

魯哥氏(Lugol’s)溶液(碘液)

取6克碘化鉀溶于20毫升蒸餾水中,攪拌到溶解后,加入4克碘,等碘充分溶解,在加入80毫升蒸餾水,貯存在棕色試劑瓶?jī)?nèi)。

碘液用來(lái)測(cè)試食物樣品或葉片中的淀粉,也用作染色劑,例如可染色鞭毛、纖毛和細(xì)胞核等。

3、檢查蛋白質(zhì)的試劑

配方一    米倫(Millon)試劑

在60毫升濃硝酸(比重1.42)中溶解40克汞(水浴加溫可助溶),溶解后加入兩倍體積的蒸餾水稀釋,靜置澄清后,取它上層的清液備用。這種試劑可長(zhǎng)期保存。

在待測(cè)物中加入少量米倫試劑,加熱,如果有蛋白質(zhì),會(huì)出現(xiàn)紅色。這種試劑不能用來(lái)測(cè)定尿中的蛋白質(zhì)。

配方二    雙縮尿試劑

分別配制10%氫氧化鈉溶液和1%硫酸銅溶液。

在3毫升待測(cè)物中加入1毫升10%氫氧化鈉溶液和1滴1%硫酸銅溶液。如果有蛋白質(zhì),會(huì)出現(xiàn)紫色反應(yīng)。

4、檢查脂肪的試劑

蘇丹Ⅲ(Ⅳ)酒精飽和溶液

取0.2克蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ),放入純酒精中,加熱,使它充分溶解,成為飽和酒精溶液,過(guò)濾后密閉在試劑瓶?jī)?nèi)保存?zhèn)溆谩?

5、酸堿指示劑

配方一    酚酞試劑和試紙

酚酞試劑  取1克酚酞,溶解在100毫升60%的酒精溶液里,裝在試劑瓶?jī)?nèi)密閉保存。

酚態(tài)試紙  取1克酚酞,溶解在100毫升95%酒精溶液里,加入00毫升蒸餾水。把綠紙條放入酚酞溶液中浸濕后,取出,放在無(wú)氨氣影響處晾干。

酚泰試劑(試紙)  pH值變色范圍8.2~10,在酸性和中性溶液中都無(wú)色,再堿性溶液中呈深紅色。

配方二    紅藍(lán)石蕊試紙

取市售石蕊1克,放在80毫升10%酒精溶液中攪拌,使它溶解,然后過(guò)濾。把濾液分成兩份。1份滴入稀磷酸或稀硫酸,到出現(xiàn)紅色為止。另1份滴入稀氫氧化鈉溶液,到出現(xiàn)藍(lán)色為止。在上述制備的溶液中分別浸濕濾紙條,隨后取出濾紙條,放在蔽光處、無(wú)酸堿性氣體影響的地方晾干,即的紅、藍(lán)兩種石蕊試紙。

紅石蕊試紙?jiān)趬A性溶液中變藍(lán),藍(lán)石蕊試紙?jiān)谒嵝匀芤褐凶兗t。

6、檢查二氧化碳的試劑

檢查二氧化碳的試劑,可用溴代麝香草酚藍(lán)溶液和石灰水。

配方一    溴代麝香草酚藍(lán)溶液

取0.1克溴代麝香草酚藍(lán),溶解在100毫升蒸餾水里,滴入少量0.1%氫氧化鉀溶液,使它成為弱堿性溶液而呈藍(lán)色。

溴代麝香草酚藍(lán)溶液pH值變色范圍是6.0(黃)~7.6(藍(lán))。待測(cè)物中如果有二氧化碳,會(huì)形成碳酸而使溶液變成黃色。

配方二    石灰水

在蒸餾水中加入生石灰(氧化鈣),變加邊攪拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈飽和狀態(tài)時(shí)為止。在石灰水澄清后,傾出上層清液,用濾紙過(guò)濾,放在密閉瓶?jī)?nèi)保存。

如果測(cè)定的物質(zhì)中有二氧化碳,會(huì)生成碳酸鈣,使石灰水變渾濁。

7、檢查細(xì)胞生活力的試劑

檢查細(xì)胞有無(wú)生活力,可用中性紅甲基藍(lán)試劑。配制的方法是先分別配制1%中性紅溶液和1%甲基藍(lán)溶液,這兩種溶液各取1份混合,用來(lái)鑒定細(xì)胞的死活。該試劑使活細(xì)胞的液泡染上紅色,而使死細(xì)胞全部染成藍(lán)色。

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