流式細(xì)胞計(jì)的技術(shù)參數(shù)

為了表征儀器性能，往往根據(jù)使用目的和要求而提出幾個(gè)技術(shù)參數(shù)或指標(biāo)來(lái)定量說(shuō)明。對(duì)于流式細(xì)胞計(jì)常用的技術(shù)指標(biāo)有熒光分辨率、熒光靈敏度、適用樣品濃度、分選純度、可分析測(cè)量參數(shù)等。

　　（1）熒光分辨率：強(qiáng)度一定的熒光在測(cè)量時(shí)是在一定道址上的一個(gè)正態(tài)分布的峰，熒光分辨率是指兩相鄰的峰可分辨的最小間隔。通常用變異系數(shù)（C.V值）來(lái)表示。C.V的定義式為：

　　C.V=σ/μ

　　式中，σ為標(biāo)準(zhǔn)偏差，μ是平均值。

　　在實(shí)際應(yīng)用中，我們使用挖關(guān)系式σ=0.423FWHM；其中FWHM為峰在峰高一半處的峰寬值。目前儀器的熒光分辨率均優(yōu)于2.0%。

　　（2）熒光靈敏度：反映儀器所能探測(cè)的最小熒光光強(qiáng)的大小。一般用熒光微球上所標(biāo)可測(cè)出的FITC（fluorescein isothiocyanate 異硫氰基熒光素）的最少分子數(shù)來(lái)表示。目前儀器均可達(dá)到1000左右。

　　（3）分析速度/分選速度：儀器每秒種可分析/分選的數(shù)目。一般分析速度為5000～10000；分選速度掌握在1000以下。

　　（4）樣品濃度：主要給出儀器工作時(shí)樣品濃度的適用范圍。一般在10^5～10⁷細(xì)胞/ml的數(shù)量級(jí)。