蜂王漿和蜂王漿凍干粉中8種大環(huán)內(nèi)酯類和林可胺類藥物殘留量的測(cè)定

時(shí)間：2023-03-25 05:28:40來源：food欄目：食品快速檢測(cè) 閱讀：

蜂王漿和蜂王漿凍干粉中8種大環(huán)內(nèi)酯類和林可胺類藥物殘留量的測(cè)定

[db:作者] / 2022-12-12 00:00

6.2.3.6 測(cè)定

(1) 液相色譜條件

色譜柱：Atlantis C18，3um，150mm×2.1mm(內(nèi)徑)或相當(dāng)者；流動(dòng)相：A為乙腈，B為0.1%甲酸水溶液，C為甲醇。梯度洗脫條件見表6-15；流速：0.2mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：20μL。

(2) 質(zhì)譜條件

離子源：電噴霧離子源；掃描方式：正離子掃描；檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)；電噴霧電壓：5500V；霧化氣壓力：0.24MPa；輔助氣流速：0.4L/min；離子源溫度：550℃；碰撞室出口電壓：2.0V；定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、碰撞氣能量和去簇電壓，見表6-4。

(3)定性測(cè)定

被測(cè)組分選擇1個(gè)母離子，2個(gè)以上子離子，在相同的試驗(yàn)條件下，樣品中待測(cè)物質(zhì)的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)溶液中對(duì)應(yīng)的保留時(shí)間偏差±2.5%之內(nèi)；且樣品中各定性離子相對(duì)豐度與濃度接近的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中被測(cè)物的各定性離子相對(duì)豐度的比值k，偏差不超過表1-5規(guī)定的范圍，則可判定為樣品中存在對(duì)應(yīng)的待測(cè)物。

(4)定量測(cè)定

在儀器最佳工作條件下，以基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的工作曲線對(duì)樣品進(jìn)行定量，應(yīng)使樣品溶液中林可霉素、紅霉素、替米考星、泰樂菌素、克林霉素、螺旋霉素、吉他霉素和交沙霉素的響應(yīng)值在儀器測(cè)定的線性范圍內(nèi)。在上述色譜條件和質(zhì)譜條件下，林可霉素、紅霉素、替米考星、泰樂菌素、克林霉素、螺旋霉素、吉他霉素和交沙霉素的保留時(shí)間見表6-4。林可霉素、紅霉素、替米考星、泰樂菌素、克林霉素、螺旋霉素、吉他霉素和交沙霉素的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)色譜圖見圖6-3。

6.2.3.7 分析條件的選擇

(1) 提取溶液的選擇

對(duì)不同pH條件下Tris溶液從蜂王漿中提取大環(huán)內(nèi)酯類藥物的效率進(jìn)行了對(duì)比實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表6-24。

表6-24 不同提取溶液的提取效果(峰高，峰面積)

從表6-24中數(shù)據(jù)可以看出，提取液的pH條件對(duì)蜂王漿中提取大環(huán)內(nèi)酯類藥物的效率有很大影響。對(duì)于峰高：測(cè)定林可霉素，合適的pH條件范圍是在8.5、9.0、9.5之間；測(cè)定紅霉素，合適的pH條件范圍是在8.0、8.5、9.0、9.5之間，并隨著pH的增加而增加；測(cè)定替米考星，合適的pH條件范圍是在8.0、8.5、9.0、9.5之間；測(cè)定泰樂菌素，合適的pH條件范圍是在9.0、9.5之間；測(cè)定螺旋霉素，合適的pH條件范圍是在8.0、8.5、9.0、9.5之間；測(cè)定吉他霉素，合適的pH條件范圍是在8.5、9.0、9.5之間；測(cè)定克林霉素，合適的pH條件范圍是在8.0、8.5、9.0、9.5之間；測(cè)定交沙霉素，最合適的pH條件范圍是在9.0、9.5之間。

對(duì)于峰面積：林可霉素在pH條件范圍8.5、9.0、9.5之間沒有明顯變化，在pH條件范圍8.0、8.5、9.0、9.5之間沒有明顯變化，紅霉素隨著pH的增加而增加；替米考星在pH條件范圍8.0、8.5、9.0、9.5之間沒有明顯變化，測(cè)定泰樂菌素在pH條件范圍9.0、9.5之間沒有明顯變化，螺旋霉素在pH為9.0時(shí)最高，吉他霉素在pH為9.0時(shí)最高，克林霉素在pH條件范圍9.0、9.5最大，交沙霉素最合適的pH條件范圍是在9.0、9.5之間；所以本方法采用pH為9的Tris溶液作為提取液。

(2) 質(zhì)譜條件的優(yōu)化

采用注射泵直接進(jìn)樣方式，以20μL/min的速度將大環(huán)內(nèi)酯類抗生素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液注入離子源，用正離子檢測(cè)方式對(duì)8種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素進(jìn)行一-級(jí)質(zhì)譜分析(Q1掃描)，得到質(zhì)子化分子離子峰分別為407、734、869、916、425、843、772、828，再對(duì)質(zhì)子化分子離子進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜分析(子離子掃描)，得到碎片離子信息。然后對(duì)去簇電壓(DP)，碰撞氣能量(CE)，電噴霧電壓、霧化氣等進(jìn)行優(yōu)化，使分子離子與特征碎片離子對(duì)強(qiáng)度達(dá)到最佳。然后將質(zhì)譜儀與液相色譜聯(lián)機(jī)，再對(duì)離子源溫度，輔助氣流速進(jìn)行優(yōu)化，使樣液中8種抗生素離子化效率達(dá)到最佳。

(3) 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定質(zhì)譜條件

用系列基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，分別進(jìn)樣。在儀器最佳工作條件下，以基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線對(duì)樣品進(jìn)行定量，樣品溶液中八種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器測(cè)定的線性范圍內(nèi)。

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